红外分光光度计由光源发出的光，被分为能量均等对称的两束，一束为样品光通过样品，另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后，被扇形镜以一定的频率所调制，形成交变信号，然后两束光和为一束，并交替通过入射狭缝进入单色器中，经离轴抛物镜将光束平行地投射在光栅上，色散并通过出射狭缝之后，被滤光片滤除高级次光谱，再经椭球镜聚焦在探测器的接收面上。探测器将上述交变的信号转换为相应的电信号，经放大器进行电压放大后，转入础/顿转换单位，计算机处理后得到从高波数到低波数的红外吸收光谱图。
使用红外分光光度计的注意事项：
1、在使用之前要注意将其厂家附带的使用说明书熟读一遍，以便能够对将其操作的具体流程以及注意事项有一个大致的了解。同时还要注意对其整个仪器进行较为细致的检查，及时发现检查该光度计是否存在问题。
2、使用时一定要注意按照开机、校正、检测样品、保存数据、取出样品、复位、关机等正确的步骤对其进行有序的操作，并且用户要轻轻的操作仪器，避免对其进行胡乱的拍打或剧烈撞击。另外，在使用的过程中一定要注意不能擅自对分光光度计进行调整，更不能拆卸其中的零件。
3、在每次样品测定结束后要注意保证红外分光光度计设备干净整洁，尤其是对于不小心残留在仪器表面的液体要及时的清理干净，同时还要注意将其仪器的所在房间打扫干净。分光光度计不使用的话一定要记得将其电源开关及时的关掉。
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